中科院碩士論文：轉(zhuǎn)基因大豆導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物肌體炎癥！
作者：過(guò)路道人
核心提示：中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）的碩士論文：《飼料中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)及對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物安全性評(píng)價(jià)的初步研究》及相關(guān)論文《進(jìn)口轉(zhuǎn)基因大豆（Roundup Ready）對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)和生理的影響》指出，將含有30%轉(zhuǎn)基因豆粕的羅非魚飼料,飼喂羅非魚，僅僅經(jīng)過(guò)數(shù)小時(shí)后，轉(zhuǎn)基因大豆中的外源基因片段能在胃腸道中檢出，四周后的檢測(cè)則發(fā)現(xiàn)已經(jīng)侵入到了羅非魚肌體內(nèi)部，7周后則導(dǎo)致羅非魚肌體內(nèi)部產(chǎn)生炎癥！研究顯示，在羅非魚心臟、肝臟、腸、胃、卵巢、精巢、腦、鰓絲、脾臟、膽囊、肌肉等不同部位的DNA中都能檢測(cè)到外源基因的存在。該研究還指出，采用巢式PCR檢測(cè)方法對(duì)市場(chǎng)上的豆制品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，市場(chǎng)上有46.5%的豆制品被檢測(cè)出含有轉(zhuǎn)基因成分。
另外，根據(jù)中科院網(wǎng)站的報(bào)道稱，由海洋生物技術(shù)研究與開(kāi)發(fā)中心劉梅、王雷等承擔(dān)的青島市科技發(fā)展項(xiàng)目“轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)及安全性評(píng)價(jià)方法的研究”通過(guò)驗(yàn)收和成果鑒定。從成果的內(nèi)容判斷，該成果的核心內(nèi)容與這篇碩士論文的主要研究?jī)?nèi)容非常一致。報(bào)道指出，該項(xiàng)目首次研究了轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)羅非魚生理生化指標(biāo)的影響、轉(zhuǎn)基因大豆中外源基因在羅非魚各組織中的分布以及外源基因在養(yǎng)殖水體微生物間的漂流。鑒定委員一致認(rèn)為，研究成果總體達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。
中國(guó)科學(xué)院碩士論文：飼料中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)及對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物安全性評(píng)價(jià)的初步研究
作者：陶冉
信息來(lái)源一：
中國(guó)科學(xué)院碩士論文：飼料中轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)及對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物安全性評(píng)價(jià)的初步研究
http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-80068-2008117269.htm
信息來(lái)源二：
與本論文相關(guān)的、由論文作者發(fā)表的相關(guān)論文之一：攝食轉(zhuǎn)基因大豆羅非魚各組織中轉(zhuǎn)基因成份的檢測(cè)研究
http://www.chemdrug.com/databases/7_36_gpwncsxmdgwemxsm.html
信息來(lái)源三：
與本論文相關(guān)的、由論文作者發(fā)表的相關(guān)論文之二：進(jìn)口轉(zhuǎn)基因大豆（Roundup Ready）對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)和生理的影響 http://www.doc88.com/p-74762740168.html
【摘要】： 自轉(zhuǎn)基因作物問(wèn)世以來(lái),轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性問(wèn)題一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)。本文根據(jù)GenBank中登錄的轉(zhuǎn)基因大豆完整外源DNA序列設(shè)計(jì)了幾對(duì)引物,對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆進(jìn)行了巢式PCR檢測(cè)。結(jié)果表明,巢式PCR可以擴(kuò)增10-10g/μl濃度的DNA溶液,檢測(cè)靈敏度高達(dá)0.01%。該巢式PCR技術(shù)具有高度特異性、靈敏度和很好的重復(fù)性。用巢式PCR對(duì)部分市售的水產(chǎn)飼料和豆制食品進(jìn)行檢測(cè),90.6%的水產(chǎn)飼料和46.5%的食品能檢測(cè)出外源基因片段,表明轉(zhuǎn)基因大豆廣泛存在于水產(chǎn)飼料和我們的日常食品中,為食品安全分析和管理提供了方法和依據(jù)。環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)依賴于能夠識(shí)別靶序列上6個(gè)特異區(qū)域的引物和一種具有鏈置換特性的DNA聚合酶,在等溫條件下可高效、快速、高特異地?cái)U(kuò)增靶序列。本研究建立了轉(zhuǎn)基因大豆的LAMP擴(kuò)增技術(shù),針對(duì)豆制品以及飼料的轉(zhuǎn)基因LAMP檢測(cè)技術(shù)正在研究和開(kāi)發(fā)中。 利用轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因豆粕制作的飼料,喂養(yǎng)吉富羅非魚,分別于4周、7周取樣,對(duì)其體重和血液指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)顯示,投喂轉(zhuǎn)基因飼料7周以后,增重率和血清指標(biāo),轉(zhuǎn)基因組與非轉(zhuǎn)基因飼料組相比沒(méi)有顯著差異。全血指標(biāo)中白細(xì)胞數(shù)目、大血小板比率、平均血小板體積和血小板體積分布寬度4項(xiàng)指標(biāo)顯著高于非轉(zhuǎn)基因飼料組,而且差異達(dá)到極顯著水平。由以上結(jié)果可見(jiàn),轉(zhuǎn)基因大豆與非轉(zhuǎn)基因大豆相比,對(duì)羅非魚的一些生理過(guò)程造成了一定的影響,但是并未對(duì)其生長(zhǎng)造成可見(jiàn)的影響。分別于投喂1h、4h和8h以后取羅非魚胃內(nèi)容物、腸道內(nèi)容物和糞便,并分別于4周、7周和繼續(xù)饑餓2周后,取羅非魚不同組織,提取DNA,用巢式PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆中的外源基因在各種組織中的分布,結(jié)果顯示在胃內(nèi)容物、腸內(nèi)容物、糞便、心臟、肝臟、胃、腸、卵巢、精巢、腦、鰓絲、脾臟、膽囊、肌肉等不同部位的DNA中都能檢測(cè)到外源基因的存在,說(shuō)明轉(zhuǎn)基因大豆中的外源DNA并不能被羅非魚的消化道完全降解,其DNA片段可能通過(guò)消化吸收轉(zhuǎn)移到魚體的各種組織。在投喂轉(zhuǎn)基因飼料7周以后以及停止投喂饑餓2周以后分離水體中的微生物,提取其DNA,進(jìn)行轉(zhuǎn)基因檢測(cè)。結(jié)果顯示在所分離純化的各種微生物中都沒(méi)有檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因大豆中外源基因35S-EPSPS的存在。
【關(guān)鍵詞】：轉(zhuǎn)基因大豆 檢測(cè) 巢式PCR 羅非魚 安全性評(píng)價(jià)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：S963
【目錄】：
中文摘要5-6
Abstract6-8
引言8-9
1 前言9-27
1.1 全球轉(zhuǎn)基因作物的發(fā)展現(xiàn)狀9-10
1.2 轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題10-14
1.3 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)的研究進(jìn)展14-20
1.4 巢式PCR(nested PCR)和環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)簡(jiǎn)介20-22
1.5 本研究的必要性、主要內(nèi)容和意義22-27
2 轉(zhuǎn)基因作物及水產(chǎn)飼料的檢測(cè)27-39
2.1 材料和方法27-33
2.2 結(jié)果和分析33-39
3 含有轉(zhuǎn)基因成分的飼料對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物安全性評(píng)價(jià)的初步研究39-51
3.1 材料和方法39-40
3.2 結(jié)果和分析40-51
4 結(jié)論和討論51-59
4.1 樣品DNA 提取方法51
4.2 轉(zhuǎn)基因作物及其產(chǎn)品的PCR 檢測(cè)51-53
4.3 轉(zhuǎn)基因大豆的 LAMP 檢測(cè)53-54
4.4 轉(zhuǎn)基因飼料的檢測(cè)54
4.5 轉(zhuǎn)基因飼料對(duì)羅非魚生長(zhǎng)和生理的影響54-56
4.6 轉(zhuǎn)基因大豆外源基因在羅非魚體內(nèi)各組織器官的殘留以及在養(yǎng)殖水體微生物的漂移56-59
5 實(shí)驗(yàn)總結(jié)59-60
5.1 創(chuàng)造性成果59
5.2 存在的問(wèn)題與建議59-60
參考文獻(xiàn)60-68
發(fā)表論文目錄68-69
致謝69
附文一：進(jìn)口轉(zhuǎn)基因大豆（Roundup Ready）對(duì)吉富羅非魚生長(zhǎng)和生理的影響
http://www.doc88.com/p-74762740168.html
附文二：轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)及安全性評(píng)價(jià)方法研究取得進(jìn)展
http://www.cas.cn/ky/kyjz/200802/t20080204_1028997.shtml
